Monitoring des Makrozoobenthos für die LHM

Die Erhebungen erfolgen in Isar, Kleine Isar, Wenzbach, Brunnbach mit Quelle, Kalterbach, Würmkanal, Fischbach, Erlbach, Maria-Einsiedelbach, Auermühlbach und Schwabinger Bach.

Vorgesehen sind 14 Probestellen, 22 klassische Begehungen und 13 eDNA-Beprobungen. Im Vordergrund stehen 26 Arten aus den Gruppen Eintagsfliegen, Käfer, Köcherfliegen und Steinfliegen mit hoher beziehungsweise sehr hoher Schutzpriorität für München.

Je Probestelle ist mindestens ein Kartierungsgang im Frühjahr und einer im Spätsommer oder Herbst erforderlich. Vorgesehen sind Wasserkescherfänge, Kick Sampling, aktiver Keschereinsatz, Siebfänge auf Sicht, Handaufsammlungen, die Erfassung aller Teilhabitate innerhalb einer festgesetzten Suchzeit von in der Regel einer Stunde sowie ergänzende Fänge von Imagines.

Die genaue Lage der Probestellen an Isar und Kleiner Isar wird nach Auftragsvergabe gemeinsam mit der Auftraggeberin festgelegt. In jeder der fünf Isar- und Kleinen-Isar-Ellipsen ist eine Probestelle festzulegen: Kleine Isar, Isar an der Weideninsel, Isar am Flaucher, Isar auf Höhe des Tierparks und Isar südlich der Marienklausenbrücke.

Die wasserlebenden Wirbellosen sind auf Artniveau zu bestimmen, soweit die anerkannten wissenschaftlichen Standards dies zulassen. Für morphologisch schwer bestimmbare Taxa kann zusätzlich eine genetische Artbestimmung mittels COI-Barcoding, DNA-Extraktion und Sanger-Sequenzierung durchgeführt werden.

An der Isar an der Weideninsel, am Flaucher und an der Marienklause sind eDNA-Proben zu nehmen. Die eDNA-Beprobung erfolgt durch eDNA-Metabarcoding nach dem aktuellen Stand von Wissenschaft und Technik.

Das eDNA-Labor muss ein etabliertes Kontaminations-Management-System mit strikter räumlicher Trennung von Pre-PCR- und Post-PCR-Bereichen, unidirektionalem Arbeitsfluss und einem Dekontaminationskonzept besitzen. Das für die Probenahmen eingesetzte Personal muss für eDNA-Probenahmen geschult sein.

Die eDNA-Probenahmen sind mit Filtertyp, Volumen, Methode und geografischen Koordinaten zu protokollieren. Einwegmaterial ist zu bevorzugen; wiederverwendbares Material ist zu kennzeichnen und getrennt zu protokollieren. Mehrwegausrüstung ist regelmäßig zu reinigen, bevorzugt mit mindestens 1,5 Prozent Natriumhypochlorit mit anschließendem Spülen in DNA-freiem Wasser. Die Proben sind lückenlos durch Tiefkühlung oder Pufferlösung zu konservieren.

Die eingesetzten eDNA-Methoden sind transparent darzustellen, einschließlich Sequenziertiefe, Primer, Extraktionschemie, PCRs, Tags, Positiv- und Negativkontrollen, Bioinformatik-Pipeline mit Parametern und Filter-Schwellenwerten, Sequenzausschlüssen, Kontrollinterpretation, statistischer Analyse sowie verwendeter Referenzdatenbank mit Version und Gap-Analyse.

An jeder Probestelle und Begehung sind abiotische Wasserparameter zu messen, unter anderem Temperatur, Sauerstoff sowie Nitrat und Nitrit. An Erlbach, Kalterbach und Fischbach sind Temperatur-Datenlogger für kontinuierliche Messungen über die ganze Saison einzusetzen.

Die Gliederung des Gutachtens ist mit der Auftraggeberin abzustimmen. Das Gutachten enthält die Erfassungsmethodik, Karten, Tabellen, Grafiken, Fotos und vergleichbare Angaben und ist zusätzlich allgemein verständlich zusammenzufassen.

Es ist als PDF und in einem editierbaren Word-kompatiblen Format abzugeben. Abbildungen sind zusätzlich als PDF und JPG zu liefern. Sämtliche Artnachweise sind mit den erforderlichen Angaben in Karla.Natur einzupflegen und als Excel-Export bereitzustellen. Der LfU-Artcode ist in allen Tabellen und GIS-Dateien anzugeben.

Alle Untersuchungsstellen sind digital in GIS-Dateien als Shape im projizierten Koordinatensystem ETRS-1989-UTM-Zone-32N zu dokumentieren.

Für die eDNA-Ergebnisse sind vollständige Sequenz-Rohdaten, Metadaten mit Tags und Primer, gefilterte Sequenzdaten als Fasta und/oder CSV, OTU- oder ASV-Ergebnistabellen mit relativen Häufigkeiten, taxonomischer Zuordnung, Zuordnungskonfidenz beziehungsweise Sequenzähnlichkeit und Read-Anzahl sowie gefilterte finale und ungefilterte Ergebnislisten zu liefern.

Erforderliche Ausnahmegenehmigungen für Fang und Belegnahme sind selbstständig einzuholen. Die Leitungsrechte sind mit dem Monitoring-Auftrag abzustimmen.

Ein Auftakt- und ein Abschlussgespräch sind mit je 2,5 Stunden einzuplanen. Vor- und Nachbereitung sowie Reisezeiten sind zu berücksichtigen.

Vertiefte Kenntnisse in der Artbestimmung der relevanten Taxa sind nachzuweisen. Das beauftragte eDNA-Labor muss nach dem aktuellen Stand der Wissenschaft und Technik arbeiten und ein etabliertes Kontaminations-Management-System besitzen.

Es sind drei vergleichbare Referenzen zur Erfassung des Makrozoobenthos und zwei vergleichbare Referenzen mit Anwendung von eDNA vorzulegen. Die Leistungen dürfen nicht älter als fünf Jahre sein und müssen vollständig abgeschlossen sein. Bei einem Leistungszeitraum von über einem Jahr muss mindestens ein Zeitraum von einem Jahr abgeschlossen sein; maßgeblich ist das Ende der Angebotsfrist.

Für jede Referenz sind Auftraggeber, Auftragsgegenstand, Kontaktperson, Nettoauftragswert und Leistungszeitraum anzugeben. Bei Anhaltspunkten für eine unzutreffende Referenzerklärung kann vor Zuschlagserteilung eine Bestätigung des Referenzauftraggebers verlangt werden.

Im Fragebogen zur Eignungsprüfung sind Registergericht mit Sitz, Registernummer und Umsatzsteuer-ID anzugeben. Zwingende und fakultative Ausschlussgründe sind mit Ja oder Nein zu beantworten und gegebenenfalls zu erläutern.

Bei einem fakultativen Ausschlussgrund ist dem Angebot zwingend eine erläuternde Anlage beizufügen. Zudem kann je nach Bietergemeinschaft und Unterauftragnehmereinsatz eine Erklärung zur Bietergemeinschaft, ein Verzeichnis der Leistungen und Kapazitäten anderer Unternehmen oder eine Verpflichtungserklärung einzureichen.

Im Konzept anzugeben ist, welche Personen die Kartierarbeiten jeweils durchführen. Vorgesehene Subunternehmer sind zwingend zu benennen. Übertragene Teilleistungen müssen eigenständig und abgrenzbar sein; bei Bedarf ist die Zuordnung im Verzeichnis der Leistungen und Kapazitäten anderer Unternehmen zu erläutern.

Das Angebot muss alle Mindestanforderungen erfüllen. Nebenangebote sind nicht zugelassen. Eignung und das Nichtvorliegen von Ausschlussgründen sind mit den wirksam festgelegten Unterlagen zu belegen. Für Unterauftragnehmer gelten ohne gesonderte Festlegungen dieselben Prüfgrundsätze wie für den Bieter.